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介紹EMSA的工作原理

更新時間:2022-03-28   點擊次數(shù):1815次
  EMSA全稱是ElectrophoreticMobilityShiftAssay,中文叫凝膠遷移實驗或電泳遷移率實驗,它是一種研究DNA與蛋白質或RNA與蛋白質相互作用的常用技術,可用于定性和定量分析。
  這項技術是基于DNA/蛋白質或RNA/蛋白質復合物在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理。首先讓蛋白質與末端標記的核酸探針結合,然后在跑PAGE膠,結合了蛋白質的復合物比未結合蛋白質的探針電泳的速度要慢,這樣,從PAGE膠的電泳結果就可以判斷,該蛋白是否和特定序列結合或者該序列是否和蛋白結合。
  通過電泳遷移率的變化來進行定性和定量分析,EMSA實驗(凝膠/電泳遷移率實驗)基于素標記探針與對應的DNA結合蛋白的特異性結合,設計合理、科學的實驗方案,為客戶提供驗證性的EMSA,競爭性的EMSA以及超遷移EMSA(Super-shiftEMSA)實驗服務。
  1、細胞核蛋白或純化的轉錄因子,部分實驗亦可使用重組表達的蛋白,依據(jù)實驗設計每張膜至少提供50ul,濃度大于0.5mg/ml。
  2、探針序列,如無探針序列,請?zhí)峁〥NA結合蛋白相關信息或相關文獻,便于技術人員設計探針。
  3、結合蛋白特異性抗體50ul以上,濃度大于0.5mg/ml。

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